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Servicio de Cultivos Celulares



1.    DESCRIPCIÓN

2.    EQUIPAMIENTO




SERVICIO DE CULTIVOS CELULARES


1. DESCRIPCION

En el Servicio  de Cultivos Celulares del CABD se pueden realizar, cumpliendo la normativa vigente, procedimientos experimentales de cultivos primarios de células humanas, células de ratón  y de líneas celulares establecidas. Tanto las líneas celulares como los cultivos primarios pueden ser modificados genéticamente mediante transfección o mediante infección por medio de vectores virales.

El Servicio de Cultivos Celulares brinda apoyo técnico a los grupos de investigación del CABD.

El servicio consta de una sala de cultivos celulares P2 y un equipo de microscopía de alta resolución para el seguimiento de los cultivos in vivo (Celldiscoverer7).

Técnico responsable: Corín Díaz Ramos


Servicios disponibles

• Control de acceso de usuarios (registro de usuarios autorizados).
• Asesoramiento técnico a los usuarios que lo requieran.
• Colaboración en la elaboración / actualización de las reglas de uso de las salas de cultivo celular. Supervisión del cumplimiento de estas normas.
• Asignación de equipos y turnos de uso / limpieza de estos equipos.
• Mantenimiento preventivo / limpieza de equipos específicos etc.
• Mantenimiento en cultivo de líneas celulares.


a. Características de la sala de cultivos celulares P2


El laboratorio de cultivos celulares está indicado para el trabajo de cultivos primarios de células humanas, células de ratón y para el cultivo de líneas establecidas. La utilización de virus y vectores estará restringido únicamente al personal autorizado para dicha utilización. En principio tendrán permiso de entrada aquellos vectores que puedan ser utilizados en un P2 y que además hayan pasado el visto bueno de los responsables del Servicio, dando su conformidad para trabajar en una sala de nivel P2.
La sala de cultivos celulares P2 está equipada con el material básico necesario para obtener y mantener cultivos celulares en un laboratorio.

2. EQUIPAMIENTO

El Servicio de Cultivos Celulares del CABD está equipado por los siguientes intrumentos:

 
 


    1.    Dos Cabinas de bioseguridad de clase  II: Bio II advance 3 de Telstar, una de las cuales es exclusiva para el trabajo con virus.
    
  • Dos incubadoras de cultivo celular (CO2):


    2.    Incubador HERAcell 150i CO2: Se utiliza como incubador de cuarentena
   


    3.    Incubador de CO2 Nuaire NU58416                                                               



 
 


    4.    Instalación de CO2: El equipamiento de los incubadores se complementa con una instalación de CO2 que asegura el suministro constante de CO2 a los incubadores, realizando un cambio automático de las botellas.
    



 


    5.    Centrifuga de sobremesa multitarea - Allegra X-12 (BECKMAN COULTER) :velocidad máxima 10.200 rpm. Capacidad máxima de 3.000 ml.
    


 


    6.    Contador automático de células: Handheld automated cell counter(Millipore)
    


 


    7.    Un Autoclave de sobremesa y un baño
    

    8. Un microscopio invertido de luz transmitida con objetivos 10x, 20x y 40x, marca Leica.
 
   
  9.   
Una bomba de vacío.
 

  10.    Un frigorífico/congelador
 


b.    Celldiscoverer 7 (
Plataforma de microscopía automatizada para imágenes de células en vivo)
  
Microscopio invertido completamente automatizado con control de C02, temperatura y humedad. Gracias a su doble juego de lentes, permite una amplificación de la muestra desde 2,5x hasta 100x. Tiene Iluminación mediante tecnología LED en luz transmitida y fluorescencia. 
Estas características permiten la observación y cuantificación del comportamiento de las células en el tiempo mediante la recopilación y el análisis de las imágenes durante todo el día de forma automática. Permite contraste de fase de alta definición, fluorescencia verde y fluorescencia roja.

Se pueden realizar estudios de: fagocitosis, apoptosis, quimiotaxis, migración e invasión celular, y citotoxicidad, permitiendo la monitorización de células madre, eficiencia de transfección y eficiencia de clonación.

Características del Celldiscoverer 7

1 Microscopio

• ZEISS Celldiscoverer 7
• Reconocimiento automático de contenedores de muestras.
• Lector de código de barras
• Estabilización del enfoque.
• Cambiador de aumento 0.5x / 1x / 2x
• Trayectoria FL apocromática con tope de campo adaptativo
• ZEISS Axiocam 506 mono
• Puerto de cámara adicional
• Acceso en eje para dispensación.
• desinfección UV

2 Objectivos

• Plan-APOCHROMAT 5x / 0.35
• Plan-APOCHROMAT 20x / 0.7 autocorr
• Plan-APOCHROMAT 20x / 0.95 autocorr
• Plan-APOCHROMAT 50x / 1.2 W autocorr
Autoimmersion

3 Illuminación

• Unidad de luz transmitida:
IR-LED (725 nm) campo brillante, iluminación oblicua,
gradiente de fase de contraste
• Fluorescencia:
LED 385, 420, 470, 520, 567, 590 y 625 nm
Conjuntos de filtros multibanda de alta eficiencia
Rueda de filtro de emisión adicional accesible por el usuario

4 Accesorios

• Temperatura y control atmosférico.
(calefacción / refrigeración; CO2, O2)
• Marcos de montaje para placas de micropocillos,
incubaciones y perfusión
• Platos de inserción para platos, toboganes multicámara.
y diapositivas estándar

5 Software

• ZEN 2.3 celldiscoverer incluye módulos
para la adquisición de imágenes multidimensionales,
Diseñador de Experimentos, Azulejos y Posiciones,
Procesamiento avanzado de imágenes y análisis.
herramientas



CONTACTO 


Contact with Corín Díaz Ramos
Phone: +34 954977432
E-mail: cdiaram(at)upo(dot)es